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一抗和二抗的定義、作用與選擇
點擊次數:87 更新時間:2025-02-27

‌一抗和二抗的種屬來源通常是一樣的‌。在選擇二抗時,通常需要根據一抗的種屬來源來選擇相應的二抗。例如,如果一抗是小鼠源的單克隆抗體,那么二抗應選擇抗小鼠的二抗(如山羊抗小鼠或兔抗小鼠)。‌

一抗和二抗的定義和作用

‌一抗(primary antibody)‌:是一種免疫球蛋白,能夠特異性結合特定的蛋白,并將其純化、檢測和定量。一抗可以是多克隆抗體(pAb)或單克隆抗體(mAb),分別由多個B細胞克隆產生或由單一B淋巴細胞分泌產生。

‌二抗(secondary antibody)‌:直接與靶抗原連接的一抗結合,通常用于標記和檢測一抗。二抗可以是完整抗體或抗體片段,如IgG分子、Fab片段以及F(ab’)2片段。

選擇二抗時需要考慮的因素

‌一抗的種屬來源‌:二抗應選用與使用的一抗相同的物種來源。例如,如果一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗(如山羊抗小鼠或兔抗小鼠)。

‌一抗的類別和亞類‌:二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應的二抗就是抗IgG抗體;單克隆抗體由于存在不同的亞型,選擇二抗時需要根據一抗的類型或亞類相匹配。

‌實驗類型‌:不同的實驗類型可能需要不同類型的二抗。例如,在雙標實驗中,如果兩個一抗分別來自不同的種屬,則二抗應選擇來自第三種種屬的抗體,以避免交叉反應。

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