东京热精品乱伦,黄色三级片网站,一本一道AV无码中文字幕,久久亚洲午夜牛牛影视

上海遠慕生物科技有限公司

慢病毒感染目的細胞實驗步驟
點擊次數:374 更新時間:2024-05-27

  1. 感染預實驗
  
  以 24 孔培養板為例,同時進行目的細胞和工具細胞的感染預實驗。工具細胞可選擇 293T(人胚腎上皮細胞)、H1299(人肺癌細胞)或其它細胞。實驗材料:培養基、24 孔培養板,移液槍,槍頭, EP 管,細胞計數板、冰盒、廢液缸等。(根據目的細胞情況,可酌情使用 Polybrene)
  
  Day1:
  
  準備細胞:培養細胞至對數生長期,細胞以胰yi酶消化計數后,用細胞計數測出細胞密度,每孔接種 5×104 個細胞,添加細胞培養液至 500µL。通常情況下,該接種量的 H1299 或 293T 細胞在感染后第 3 天可生長至 80%-90% 融合度。(接種目的細胞時,請根據細胞的實際生長速度調整接種量,使目的細胞感染后第 3 天生長至 80%-90% 融合度)
  
  Day2:
  
  (1)準備慢病毒顆粒:計算所需慢病毒顆粒的量,將凍存在 -80℃ 的慢病毒顆粒取出,冰浴融化;
  
  (2)感染目的細胞:從培養箱中拿出細胞,置于顯微鏡下觀察細胞生長狀態及細胞融合度;如細胞狀態較好,則開始實驗:
  
  A. 用移液槍小心吸去 24 孔板中的舊培養液,加入新的完wan全培養液;
  
  B. 在細胞中分別加入計算好的慢病毒顆粒液,將培養板平置于工作臺上,以劃 8 字的方式輕柔混勻;
  
  C. 混勻后,細胞培養板置于 37℃、5% CO2 培養箱,過夜培養。
  
  Day3:
  
  更換培養液:感染 12-16 小時后,吸出含慢病毒顆粒的培養液,重新向培養板添加含 5% 滅活 FBS(胎牛血清)的培養液,繼續培養。(目的細胞需要調整感染時長,部分細胞不可感染超過 12 小時。)
  
  Day4:
  
  繼續培養細胞,觀察細胞狀態是否有異常。
  
  Day5:
  
  觀察(評估)慢病毒顆粒感染效率:蓋緊 24 孔培養板,使用 70% 乙醇清理培養板外壁,在倒置熒光顯微鏡觀察熒光,拍照并估計慢病毒顆粒對細胞的感染效率。(如果慢病毒顆粒攜帶的基因表達所需的時間較長,熒光表達所需時間也較長,建議感染 72、96 小時后觀測熒光表達。)
  
  根據熒光情況,可以初步從 MOI 梯度摸索實驗中,找出目的細胞的 MOI 值。

上海遠慕生物科技有限公司 版權所有 地址:上海市嘉定區曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
傳真:021-58999639 手機:13310162040 聯系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網址:m.tzwanheng.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標準品/化學試劑
點擊這里給我發消息
手機:13310162040
主站蜘蛛池模板: 国产亚洲精品无码专区| 国产午夜精品欧美| 国产操屁眼子视频在线播放| 婷婷五月综合激情| 国产成人精品月日本亚洲语音| 亚洲av本道一区二区三区四区| HEYZO少妇无码精品| 欧美色色最新| 又粗又硬又猛又黄又爽| 精品少妇流白浆在线观看| 日日人人爽人人爽人人片av| 男人添女人下部高潮全视频| 欧洲性XXXX免费视频在线观看,| 日木av无码专区亚洲av毛片| 四川一级护士一级毛片| 欧洲熟妇色xxxx欧美老妇多毛| 久久无码喷水高潮免费播放| 日本欧美久久久久免费播放网| 爱爱女人天堂| 欧美熟妇另类久久久久久多毛| 无遮挡色视频真人免费午夜| 午夜色涩视频| 欧美日韩在线亚洲综合国产人| 欧美成人禁片在线观看| 成人性生交大片免费看蜜芽| 久久婷婷国产剧情内射白浆| 欧美午夜精品推荐| 日本成本人片无码免费视频网站| 欧美性videos高清精品| 在线国产在线手机观看| 国产精品极品美女自在线观看免费| 韩国精品成年人免费视频| 成年人做爱视频网页| 久久精品国产亚洲av高清色欲| 亚洲乱码中文字幕久久孕妇黑人| 高清欧美一区二区免费影视| 色色电影黄网站不卡| 久高清无码| 中文字幕AV一区| 操嫩模视频| 亚洲精品乱码久久久久久蜜桃不卡|